Hé là, les autres passionnés de cellules! En tant que fournisseur de cellules TET - 213, j'ai eu ma juste part d'expériences traitant de ces cellules uniques. Dans ce blog, je vais partager quelques conseils sur la façon de maintenir la viabilité des cellules TET - 213.
Tout d'abord, comprenons ce que sont les cellules TET - 213. Ils sont un type de lignée cellulaire qui a montré un grand potentiel dans divers domaines de recherche, tels que les neurosciences et les études de cancer. Mais les garder en vie et les coups de pied n'est pas toujours une promenade dans le parc.
Médium de culture cellulaire
Le fondement du maintien de n'importe quelle lignée cellulaire est le bon support de culture. Pour les cellules TET - 213, un milieu de haute qualité est un must. Je recommande généralement d'utiliser un support riche en nutriments essentiels. Le milieu RPMI 1640, complété par 10% de sérum bovin (FBS), de la pénicilline et de la streptomycine, a fait des merveilles pour moi. Le FBS fournit les facteurs de croissance et les hormones dont ces cellules doivent prospérer, tandis que les antibiotiques aident à prévenir la contamination.
Assurez-vous de stocker correctement le support. Gardez-le à 4 ° C et protégez-le de la lumière. Avant de l'utiliser, réchauffez-le jusqu'à 37 ° C dans un bain-marie. Cela imite la température corporelle et est plus confortable pour les cellules.
Conditions d'incubation
TET - 213 cellules sont assez pointilleuses sur leur environnement. Ils aiment être incubés à 37 ° C dans une atmosphère humidifiée avec 5% de CO₂. Cet environnement ressemble étroitement aux conditions physiologiques du corps humain.
Investissez dans un bon incubateur. Il devrait avoir une température stable et un contrôle de CO. Vérifiez régulièrement les paramètres et l'étalonnage de l'incubateur pour vous assurer que tout est en ordre. Aussi, nettoyez l'incubateur régulièrement pour empêcher la construction de contaminants.
Subculture
La sous-culture est une étape importante dans le maintien de la viabilité cellulaire. Lorsque les cellules TET - 213 atteignent environ 80 à 90% de confluence, il est temps de les diviser. Tout d'abord, retirez l'ancien milieu et lavez les cellules avec une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) pour vous débarrasser de tout débris. Ensuite, ajoutez la solution de trypsine - EDTA pour détacher les cellules du ballon de culture. Incuber le ballon à 37 ° C pendant quelques minutes jusqu'à ce que les cellules commencent à rassembler et à se détacher.
Une fois les cellules détachées, ajoutez un milieu frais pour neutraliser la trypsine. Centrifuger la suspension cellulaire à basse vitesse pour plonger les cellules. Respirez le culot en milieu frais et transférez les cellules dans de nouvelles flacons de culture à la densité de semis appropriée. Une densité d'ensemencement d'environ 5 cellules x 10⁴ / cm² fonctionne généralement bien pour les cellules TET - 213.
Surveillance de la santé des cellules
La surveillance régulière de la santé de vos cellules TET - 213 est cruciale. Utilisez un microscope à contraste de phase pour vérifier la morphologie des cellules. Les cellules TET saines - 213 devraient avoir une forme uniforme et être bien attachée au ballon. Si vous remarquez des signes de mort cellulaire, tels que des cellules flottantes ou des formes de cellules anormales, cela pourrait être un signe d'un problème.
Vous pouvez également effectuer un test de viabilité, comme le test d'exclusion Blue Trypan. Mélanger une petite quantité de votre suspension cellulaire avec du bleu trypan. Les cellules vivantes excluront le colorant, tandis que les cellules mortes le prendront et apparaîtront bleu. Comptez le nombre de cellules vivantes et mortes à l'aide d'un hémocytomètre pour calculer le pourcentage de viabilité cellulaire.
Qualité des réactifs
L'utilisation de réactifs de haute qualité est non négociable. La qualité du FBS, des antibiotiques et d'autres additifs peut avoir un impact significatif sur la viabilité cellulaire. Lorsque vous choisissez FBS, recherchez un lot qui a été testé pour sa capacité à soutenir la croissance cellulaire. Évitez d'utiliser des réactifs ou des réactifs expirés qui ont été stockés mal.
Certains autres facteurs à considérer sont les peptides qui peuvent être utilisés en conjonction avec les cellules TET - 213. Par exemple,Protéine mélanocytaire PMEL 17 (130 - 138) (humain)a montré un potentiel dans certaines recherches liées à la signalisation cellulaire.Uchistachinine ietDynorphine A (1 - 17)sont également des peptides qui peuvent être explorés dans le contexte de la recherche sur les cellules TET - 213.
Dépannage
Si vous rencontrez des problèmes avec le maintien de la viabilité de vos cellules Tet - 213, ne paniquez pas. Voici quelques problèmes et solutions courantes:
Contamination: Si vous voyez des signes de contamination bactérienne ou fongique, comme la nébulosité dans les colonies moyennes ou visibles, jetez immédiatement les cultures contaminées. Nettoyez soigneusement l'incubateur et tout l'équipement. Assurez-vous de suivre des techniques aseptiques strictes lors de la manipulation des cellules.
Mauvaise croissance cellulaire: Si les cellules ne se développent pas bien, vérifiez le milieu de culture. Il se peut que le support soit vieux ou que les suppléments ne fonctionnent pas correctement. Assurez-vous également que les conditions d'incubation sont correctes. Parfois, un léger changement de température ou de concentration en co₂ peut affecter la croissance des cellules.
Détachement de cellules: Si les cellules se détachent trop facilement, cela pourrait être dû à la trypsization. Réduisez le temps d'incubation de la trypsine la prochaine fois. Assurez-vous également que la solution de trypsine - EDTA est fraîche.
En conclusion, le maintien de la viabilité des cellules Tet - 213 nécessite une attention aux détails et une bonne compréhension de leurs besoins. En suivant ces conseils, vous pouvez garder vos cellules TET - 213 cellules saines et productives.
Si vous êtes sur le marché des cellules TET de haute qualité - 213, j'aimerais discuter avec vous. Que vous soyez un chercheur travaillant sur un projet à petite échelle ou une entreprise de biotechnologie à grande échelle, je peux vous fournir les cellules dont vous avez besoin. Tendez la main pour commencer une conversation sur vos besoins et comment nous pouvons travailler ensemble.
Références
- Freshney, RI (2016). Culture des cellules animales: un manuel de technique de base et d'applications spécialisées. Wiley.
- Doyle, A. et Griffiths, JB (2012). Culture cellulaire et tissulaire: procédures de laboratoire. Wiley - Blackwell.