Milieu de fusion et de sélection d'hybridomes (HAT)

Description du produit

产品名称

Nom du produit

Chapeau de paille (HAT)

Milieu de fusion et de sélection d'hybridomes (HAT)

货号 Cat.No

BRS-MED01

规格

Spécification

500ml/瓶

500 ml / bouteille

产品组分

Composants

Valeur DMEM : 80 % (pour le produit)

Milieu de base DMEM : 80 % (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Sérum bovin fœtal importé (FBS) : 10 % (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Milieu conditionné : 10 % (v/v)

Quantité : 100 grammes/mL

Pénicilline : 100 U/mL

Quantité : 100 grammes/mL

Streptomycine : 100 U/mL

次黄嘌呤(Hypoxanthine):100uM

Hypoxanthine : 100 µM

Quantité de thé (Thymidine): 16uM

Thymidine : 16 µM

氨基蝶呤 (Aminoptérine) : 0,4 uM

Aminoptérine : 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Autres additifs : Diverses cytokines (quantité suffisante) et suppléments

保存条件

Conditions de stockage

-20 degrés Celsius, il fait 18 degrés Celsius.

Conserver à -20 degrés. Durée de conservation : 18 mois.

使用方法

Mode d'emploi

培养基融化:

37 degrés 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

Temps : 本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5min Il s'agit d'un cas où il y a un certain nombre de personnes.

Décongeler le support :

Décongeler le milieu dans un bain-marie à 37 degrés. Essuyez la surface extérieure avec de l'éthanol à 70 % et placez-la dans une enceinte de biosécurité pour utilisation.
Remarque : L'apparition d'une petite quantité de matière floculante blanche après décongélation est normale. Laisser le milieu reposer pendant 3 à 5 minutes pour que les flocs se déposent au fond, puis récupérer soigneusement le surnageant pour utilisation.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4 PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 degrés 5% CO2.

Fusion cellulaire et ensemencement :

Effectuez la fusion cellulaire à l’aide de méthodes physiques (électrofusion) ou chimiques (PEG conventionnel). Remettre en suspension les cellules fusionnées directement dans ce milieu à une densité et un volume appropriés :

Électrofusion : 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ cellules/puits

Fusion PEG : 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ cellules/puits
Volume recommandé : 200 µL/puits dans une plaque de 96 puits.
Incuber à 37 degrés, 5% CO₂ pour la culture.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Remplacement moyen :

Les jours 4 à 8 après la fusion-, effectuez un remplacement partiel ou complet du milieu en fonction de l'état de croissance des cellules.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Criblage des clones :

Lorsque les clones cellulaires dans les puits atteignent une taille appropriée, effectuez un dépistage positif des clones.

注意事项

Précautions

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Ce produit est toxique et est destiné uniquement à la sélection et à la culture de cellules d'hybridomes. Il ne doit pas être utilisé pour la culture d’animaux vivants, à des fins de diagnostic ou pour des applications thérapeutiques.

HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养, 不适用于 TK Il s'agit d'un système HGPRT (avec NS1, SP2/0).

Ce produit convient à la sélection et à la culture de cellules d'hybridomes à l'aide du système de sélection HGPRT. Cela ne s’applique pas aux savoirs traditionnels ou à d’autres systèmes de sélection. Ce milieu ne peut pas être utilisé pour la culture directe de cellules déficientes en HGPRT- (par exemple, NS1, SP2/0).

Le pH est compris entre 7,2 et 7,4, et le pH est compris entre 7,2 et 7,4.

Ce produit est une solution stérile avec un pH de 7,2 à 7,4. Toutes les manipulations doivent être effectuées dans des conditions aseptiques.